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突破光學顯微鏡的極限
很長一段時間里,科學家認為光學顯微鏡有一個極限:光學顯微鏡無法獲得比半光波長更好的分辨率。在熒光分子的幫助下,2014年諾貝爾化學獎的幾位獲得者巧妙的繞開了這種極限。他們突破性的研究將光學顯微鏡帶入了納米維度。
在納米顯微鏡下,科學家實現了活體細胞中單個分子通路的可視化。他們能夠觀察到分子是如何在大腦神經細胞之間生成神經突觸;他們可以追蹤帕金森病、阿爾茲海默癥和亨廷頓癥患者體內相關蛋白的累積情況;他們還能跟蹤受精卵在分裂形成胚胎時蛋白質的變化過程。
這次獲獎的是兩項獨立的技術。第一項是Stefan Hell于2000年研制的受激發射減損(STED)顯微技術。此項技術采用了兩束激光;一束負責激發熒光分子使其發光,另一束則負責抵消大部分熒光,只留下一塊納米大小體積的熒光區域。用該技術仔細掃描樣本,得出的圖像分辨率打破了Abbe提出的顯微分辨率極限。
Eric Betzig和William Moerner分別獨立地進行研究,為第二種技術打下了基礎,即單分子顯微技術。這種方法依賴于開關單個分子熒光的可能性。科學家對同一區域進行了多次“繪圖”,每次僅僅讓很少量的分散分子發光。將這些圖像疊加起來產生了密集的納米尺寸超分辨率圖像。2006年,Eric Betzig首次采用了這一技術。
顯微技術進入了納米時代,熒光染料也要與時俱進,開創新時代!
德國ChromoTek公司主要致力于細胞生物學和蛋白質組學的研發與研究。產品包括單克隆抗體、重組單域抗體、熒光抗體、GFP或RFP連接蛋白等。ChromoTek公司以“為全球研究學者開發并商業化更好的工具”作為使命,目標成為蛋白質組學和活細胞成像領域公認的領導品牌。其中,Nano-Boosters和Chromobodies?系列產品以其優異性能,更能適用于超分辨率顯微鏡!
他們的秘密武器就是納米抗體(nanobody)。這些來源于駱駝科動物的單結構域肽段與抗體相似,都有著與抗原結合的性質,不過它們的穩定性更好,體積更小,親和力更高。
1. Nano-Boosters
Nano-Boosters是由羊駝單域抗體片段(Nanobody)與熒光染料基團共價偶聯而成。在超分辨率顯微鏡中定位更準確,小于2nm抗原表面標簽位移,離真實目的基因更近,指哪是哪!
Nano-Boosters與目的蛋白結合后,熒光強度成倍增長!再也不用擔心熒光不夠亮,拍出一堆無法處理的廢片了。
熒光圖像分辨率更高,更清晰!無論是普通熒光顯微鏡,抑或是最新的超分辨率顯微鏡,Nano-Boosters都能有優異的表現。讓你能清清楚楚看細胞,明明白白做實驗。
Nano-Boosters適用范圍廣泛:
適用實驗 | 材料 | 應用 |
傳統免疫熒光 (IF) 免疫組化 (IHC) 免疫細胞化學(ICC) FISH、EdU-Click-ITTM 后信號恢復 | 細胞系 組織切片 果蠅胚胎 | 寬場熒光顯微鏡 激光共聚焦顯微鏡 超分辨率顯微鏡 (如:3D-SIM, PALM, STED, STORM) |
2. Chromobodies?
Chromobodies?是羊駝單域抗體片段(Nanobody)與熒光蛋白融合而成的質粒。這種創新的熒光納米探針可以對活細胞內源性蛋白質的結構、功能、分布及動態過程進行實時分析和可視化。(動態圖)
該產品具有特性:
· 易轉染入各類細胞、無創性
· 無過度表達、無細胞毒性
· 不影響細胞存活或遷移能力。
· 實時可視化
· 熒光維持時間久