工作原理

　　Amaxa?Nucleofector?技術是 Lonza(原Amaxa)公司的專利創新技術，它綜合應用傳統的電穿孔技術及細胞特異性細胞核轉染液，通過調整優化的電轉參數(內存轉染程序)，直接把外源基因導入原代細胞及細胞系的細胞漿和細胞核中。它不同于傳統的電穿孔儀，因為它可以把外源基因直接導入核中，而且細胞存活率遠遠高于電穿孔儀。

　　Nucleofector 技術是獨一無二的，因為它可以直接將DNA轉染到細胞核內，因此實現了因受到細胞分裂限制而一直困擾人們的原代細胞的高效率轉染。在 Nucleofector核酸轉染儀的幫助下，您可以在腫瘤研究、免疫學、組織工程學及心血管疾病研究領域中輕而易舉地獲得大于90%的高效率基因轉染率。Nucleofector 核酸轉染技術特別適用于轉染原代細胞和難以轉染的細胞系，如T細胞及PC-12細胞系等。

　　Nucleofector試劑盒包含兩個溶液：Nucleofector溶液和添加劑。兩者都是針對每個細胞類型來特異開發的。它們在核轉染過程中提供了細胞友好的環境，支持DNA直接到達細胞核。Nucleofector溶液只與Nucleofector裝置共同使用時，才能發揮作用。

　　產品優勢

　　1.不依賴細胞的有絲分裂，適用于懸浮細胞、原代細胞等難轉染細胞。

　　2. 高轉染效率，直接將外源基因轉入核內。

　　在某些細胞中Nucleofector的轉染效率可以達到90%，與病毒感染同樣有效。Nucleofector直接將DNA運送到細胞核中，因此，基因表達就可以立即開始，數小時內就可以完成轉染和分析的全過程，對于細胞系來說2-6小時就可以分析，對于原代細胞則需要4-16小時。

　　3.可轉染DNA、RNA或siRNA。

　　4.操作簡單方便，Nucleofector轉染技術操作不到1小時就能完成。

　　5.最廣泛細胞類型，全球共享的細胞轉染數據庫不斷擴大。目前已有1200余種細胞系高效轉染，130余種原代細胞成功轉染。

　　6.維持細胞生理功能。

　　Nucleofector 細胞核轉染技術操作步驟

　　整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。

　　第1步：處理細胞，精確計數

　　第2步：混合DNA、轉染液，重懸細胞，加入轉染杯

　　第3步：將轉染杯放入轉染儀，按鍵選擇相應程序，按"start"鍵開始轉染，10秒鐘左右

　　第4步：取出細胞繼續培養

　　外源基因直接導入核內。Normal human dermal fibroblasts –neonatal were nucleofected with 2.5 μg TMR-labeled plasmid DNA encoding eGFP. Fixation of cells was performed after 2 hours with 3.5 % PFA. TMR label is shown in (A), GFP fluorescence in (B), DAPI nuclear staining in (C) and a merge of all three fluorescent labels in (D).

　　最廣泛細胞類型的高效轉染