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CRISPR-RNA 等溫快速擴增凍干球(熒光型)

本試劑盒利用高敏恒溫擴增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因編輯核酸檢測技術)開 展核酸檢測。 首先對核酸樣本進行高敏恒溫擴增(H-SIA),然后向擴增產物中加入 CRISPR 反應體 系并進行恒溫檢測。若反應體系中的 crRNA(序列中含有與 Cas 蛋白結合的回文序列和與目 的基因序列互補的特異序列)識別到擴增產物中的目的基因序列,則激活 Cas 蛋白的切割活 性,剪切反應體系中的報

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超敏 CRISPR-DNA 等溫快速擴增檢測凍干球(試紙條型).png

1.產品名稱 CRISPR-RNA 等溫快速擴增凍干球(熒光型)

 

2.原理概述 本試劑盒利用高敏恒溫擴增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因編輯核酸檢測技術)開 展核酸檢測。 首先對核酸樣本進行高敏恒溫擴增(H-SIA),然后向擴增產物中加入 CRISPR 反應體 系并進行恒溫檢測。若反應體系中的 crRNA(序列中含有與 Cas 蛋白結合的回文序列和與目 的基因序列互補的特異序列)識別到擴增產物中的目的基因序列,則激活 Cas 蛋白的切割活 性,剪切反應體系中的報告 RNA,報告 RNA 被剪切后會發出熒光被儀器檢測出熒光信號; 若擴增產物不含目的基因序列,則不激活 Cas 蛋白,報告 RNA 不被剪切,無熒光信號被采 集。 


3.主要組成成分 

組成部分.png

4.產品特點 4.1 外觀:試劑盒包裝完整,模板稀釋液無漏液。 4.2 檢測下限:檢測自建體系性能達到 100 copy/mL。不同體系檢測性能會略有差異。 4.3 重復性:試劑檢測同一樣本 10 次,結果均一致。 


5.有效期 2-8℃避光下有效期為 12 個月。28±2℃避光保存下有效期為 3 個月。

 

6.檢測方法 

6.1 準備模板:采用模板稀釋液按照試驗要求稀釋模板。 

6.2 H-SIA 等溫擴增:取 1.5 ml 離心管放入 1 H-SIA 球,加入引物探針,加入 45.5 μl 模 (終體積為 50ul),輕彈幾次混勻。后 42℃孵育 20 min。 

注:F/R 引物推薦用量:10 μM,各加入 1-2μl; 探針推薦用量:500-1000 ng/T??筛鶕筮M行調整。 

6.3 CRISPR 剪切反應:將 1 CRISPR 凍干球放入 8 反應管中,加入 45 ul 水溶解,加入 crRNA,加入 5uL 等溫擴增產物,上下顛倒混勻后離心。后將 8 聯排放于熒光定量 PCR 中, 37℃恒溫反應,30s 采集一次信號(FAM 通道),設置 60 個循環。 

注:crRNA 推薦用量:100-500 ng/T??筛鶕w系進行調整。 檢測通道可根據引物探針不同進行更改。

 

7.注意事項 

7.1 本試劑用于體外檢測,僅供科研使用,使用前請仔細閱讀本說明書。 

7.2 本試劑盤應嚴格按照說明書要求儲存,必需在有效期內使用。 

7.3 應按說明書嚴格進行操作,請勿混合使用不同批次組分。操作失誤或樣本量過少都有可 能導致檢測結果出現偏差。 

7.4 如果試劑盒包裝損壞、有破損、漏氣等,請不要使用該產品。 

7.5 試劑袋中的稀釋液、干燥劑不得吞服。稀釋液中含有少量防腐劑,可能對皮膚和眼睛造 成刺激。如果該溶液接觸到皮膚或眼睛,立即用大量清水沖洗。 如發生皮膚刺激或皮疹, 應及時就診。操作時應注意做好安全防護措施,使用前后清洗或消毒雙手。

版權所有:默瑞(上海)生物科技有限公司   

技術支持:易動力網絡